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細胞培養常見問題--出現沉淀咋整?


發布日期:[2019-12-03] 共閱[72]次

    細胞培養中會沉淀如何產生的呢?產生沉淀什么原因造成的,您知道嗎?跟著勁馬小編一起來研究研究!

    細胞培養中的沉淀

    如果排除了污染,細胞培養基中的渾濁通常被解釋為金屬、蛋白和其他培養基組分的沉淀。沉淀物可能損害細胞健康,因為他們通過螯合可移除養分和其他需要的組分,從而改變培養基的組成。沉淀物也是顯微鏡可見的,可能會干擾依賴成像的實驗分析。

    產生沉淀的可能原因

    一、溫度變化

    在細胞培養中,溫度是引起沉淀的主要因素之一。當遭遇溫度的極端變化時,高分子量血漿蛋白會從溶液中析出;熱失活和凍融循環能促進蛋白降解和沉淀;因為液體或重組成培養基在使用之間保持冷藏儲存,鹽可能沉淀,尤其是10x或其他濃縮的儲存液。

    二、失水誘導的濃度改變

    如果培養基可能蒸發,培養基組分(包括鹽) 的濃度將會增加,特別是培養基表面可能容易形成晶體沉淀。

    三、鈣鹽

    制備無血清培養基時,組分添加的順序可能導致不可溶分子的形成。鈣鹽尤其容易沉淀,比如CaCl2和MgSO4在溶液中反應產生CaSO4晶體。高壓滅菌和pH值不穩定會加劇這一問題。

    四、金屬補充物

    銅、鐵和鋅等金屬離子是細胞生長所必需的,是無血清培養基的重要補充物。培養系統中其他血清組分的缺失可能導致這些金屬沉淀,為細胞形成有毒的環境。在較高pH環境下(一般>8時),碳酸鹽和氫氧根離子與銅離子、磷酸鹽和氫氧根離子與鐵離子、碳酸鹽、磷酸鹽和氫氧根離子與鋅離子、氫氧根離子與鎂離子易形成不溶性沉淀物;在氧化條件下,銅和鋅更易于沉淀。

金屬沉淀物顏色表

    五、污染

    培養物渾濁可能是細菌或真菌污染造成的。

    細胞培養沉淀的常見原因和解決方案

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