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ELISA實驗方法之競爭法檢測抗體


發布日期:[2019-07-11] 共閱[680]次

    科研小伙伴們,又和大家見面了,今天我們給大家分析的是ELISA實驗方法之競爭法檢測抗體,在之前的文章里面,已經為大家介紹了競爭法檢測抗原、雙抗原夾心法檢測抗體、雙抗體夾心法、間接法檢測抗體等ELISA實驗方法,不知道您大家是否還有印象呢?如果沒有印象的話沒有關系,查閱我們之前更新的文章就好了,如您在這其中有其他疑問的話,可以前來咨詢我司技術人員哦!

競爭法檢測抗體

競爭法測抗體的反應模式與競爭法測抗原類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結合物,以檢測相應的抗體。當抗原材料中的干擾物質不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時,可用此法檢測特異性抗體。其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結合。標本中抗體量越多,結合在固相上的酶標抗體愈少,因此陽性反應呈色淺于陰性反應。如抗原為高純度的,可直接包被固相。競爭法測抗體有多種模式,可將標本和酶標抗體與固相抗原競爭結合,抗HBc ELISA一般采用此法。另一種模式為將標本與抗原一起加入到固相抗體中進行競爭結合,洗滌后再加入酶標抗體,與結合在固相上的抗原反應。抗HBe的檢測一般采用此法。

競爭法的簡要操作步驟:
1)先加入特異性抗原,使抗原固定結合于載體表面;
2)加入梯度濃度比例的待測樣品與酶標抗體混合物,并做只加酶標抗體的對照組;
3)加入酶促反應底物,發生顯色反應,對比實驗組及對照組的顯色差異,計算未知抗體的量。

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